유전자 녹아웃 소개
유전자 녹아웃 (knockout) 은 특정 기술적 방법을 통해 기체별 유전자를 비활성화시키거나 분실하는 기술을 말한다.
어떤 서열은 알려져 있지만 기능이 알려지지 않은 서열에 대해 생물의 유전자를 변화시켜 특정 유전자 기능을 상실하여 일부 기능을 차단하고 생물체에 더 많은 영향을 미칠 수 있다.
유전자 녹아웃은 완전한 유전자 녹아웃과 조건형 유전자 녹아웃의 두 종류로 나뉘는데, 완전한 유전자 녹아웃이란 동종 재조합법을 통해 세포나 동식물 개체의 표적 유전자 활성화를 완전히 제거하는 것을 말한다. 조건형 유전자 녹아웃은 위치 조정 시스템을 통해 특정 시간과 공간을 실현하는 유전자 녹아웃을 말한다.
CRISPR/Cas 시스템은 강력한 게놈 편집 도구입니다. 현재 널리 사용되고 있는 것은 CRISPR/Cas9 시스템입니다. 그 원리는 gRNA 특이성을 이용하여 과녁 서열을 식별하고 Cas9 핵산 내체효소를 유도하여 과녁 서열의 PAM 상류를 절단하는 것입니다. 이로 인해 과녁 부위 DNA 쌍사슬이 끊어지고, 이에 따라 세포의 비동원말단 연결 (NHEJ) 이나 동원재조합 (HDR) 을 이용하여 절단부위를 만듭니다.