DNA 마이크로어레이 기술의 주요 공정:

① 칩 준비: DNA 칩 준비 방법에는 광유도 in-situ 합성, 화학물질 분사, 접촉점 코팅, In-situ DNA 등이 있습니다. 제어된 합성, 비접촉 마이크로 기계 프린팅 방법 TOPSPOT 및 소프트 포토리소그래피 복제 등 현재 400,000개의 서로 다른 DNA 분자를 1cm2 칩에 배치할 수 있습니다.

② 시료 준비 : 시료 DNA 또는 RNA의 분리 및 정제, PCR 기술을 이용한 표적 유전자 단편의 증폭, 표적 유전자의 표지 등이 포함됩니다.

③혼성화 반응: 생체분자 간의 반응을 최적의 반응 조건으로 유지하기 위해 적절한 반응 조건을 선택합니다. 칩 혼성화는 고체-액체 상 혼성화입니다. 여기에는 표적 농도, 프로브 농도, 두 혼성화 당사자의 서열 구성, 염 농도, 온도 및 세척 조건 등 혼성화에 영향을 미치는 많은 요소가 있습니다.

넷째 칩 신호 검출 및 분석: 시료 내 표적 유전자는 칩에 고정된 프로브와 특이적으로 혼성화되어 칩의 여러 지점에 결합합니다. 특정 파장의 형광. 현재 칩 스캐닝에 사용되는 칩 스캐너에는 레이저 초점 스캐닝 칩과 CCD 칩 스캐너가 포함됩니다. 얻은 데이터는 칩 데이터의 통계 분석 및 생물학적 분석을 포함한 특수 처리 시스템에 의해 처리됩니다. , 칩 데이터베이스의 축적 및 관리, 칩 발현 유전자의 국제 인터넷 검색 및 발현 유전자 데이터베이스 분석 등

DNA 마이크로어레이 기술의 가장 큰 특징은 한 번에 여러 샘플을 검출하고 여러 유전자의 차등적인 발현 프로파일을 얻을 수 있다는 점이다. cDNA 마이크로어레이는 10,000개 이상의 유전자 발현을 동시에 검출하는 데 성공했다. . 따라서 DNA 마이크로어레이는 서로 다른 물질의 여러 유전자 발현 패턴을 병렬 비교 분석하기 위한 고출력의 새로운 유전자 분석 방법입니다. 유전자의 차등적 발현을 연구하는 기존 방법에 비해 소형화, 속도, 정확성, 고감도, 동일한 칩에서 많은 양의 정보를 병렬 검출할 수 있는 장점이 있습니다. DNA 마이크로어레이 기술은 유전자 발현 지도 작성, 표적 유전자 및 기능성 유전자 탐색 등 연구에서 눈부신 성과를 거두었다. 그러나 테스트를 통해 샘플링된 시퀀스를 모두 감지할 필요가 없고 테스트에 필요한 분석 장비가 상대적으로 복잡하다는 단점이 있습니다. 또한, DNA 마이크로어레이 기술은 소량의 전사물을 분석하는 데 한계가 있습니다. 특정 소량의 전사물이 DNA 마이크로어레이에 포함되도록 하려면 증폭 및 스팟팅을 위해 매우 많은 수의 클론을 선택해야 합니다.